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    Cell Counting Kit (CCK 試劑盒)
    • 產品貨號:
      DE5001
    • 中文名稱:
      Cell Counting Kit (CCK 試劑盒)
    • 品牌:
      BIODEE
    • 貨號

      產品規格

      售價

      備注

    • DE5001-100T

      100T

      ¥260.00

      細胞代謝試劑盒

    • DE5001-500T

      500T

      ¥420.00

      細胞代謝試劑盒

    • DE5001-1000T

      1000T

      ¥690.00

      細胞代謝試劑盒

    • DE5001-3000T

      3000T

      ¥1800.00

      細胞代謝試劑盒

    產品描述

    產品簡介:

    ? Cell Counting Kit 簡稱 CCK 試劑盒, 為 MTT 法的替代方法, 是一種基于 WST(水溶性四唑鹽,化學名: 2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
    ? WST-8 是一種類似于 MTT 的化合物, 在電子耦合試劑存在的情況下, 可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的 formazan (參考圖 1)。 細胞增殖越多越快, 則顏色越深; 細胞毒性越大, 則顏色越淺。 對于同樣的細胞, 顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。
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    CCK 法與 MTT 法之間的比較:

    細胞計數方法 MTT 法 CCK 法
    形成的 formazan 的水溶性
    產品性質 粉末 溶液
    使用方法 預先配制 無需預先配制
    檢測時間 〉 4 小時 1~4 小時
    靈敏度 靈敏度更高
    檢測波長 560~600nm 430~490nm
    細胞毒性 高, 細胞形態完全消失 低, 細胞形態不變
    試劑穩定性 一般
    是否需要 DMSO 溶解 需要 不需要
    便捷程度 一般 非常便捷



    保存條件:
    4oC 避光保存一年有效, -20oC 避光保存兩年有效。


    注意事項:
    ? 由于使用 96 孔板進行檢測, 如果細胞培養時間較長, 一定要注意蒸發問題。 一方面, 由于 96 孔板周圍一圈最容易蒸發, 可以采取棄用周圍一圈的辦法, 改加相同量的 PBS、 水或培養液; 另一方面,可以把 96 孔板置于靠近培養箱內水源的地方, 以緩解蒸發。
    ? 本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應, 所以還原劑(例如一些抗氧化劑)會干擾檢測, 如果待檢
    測體系中存在較多的還原劑, 需設法去除。
    ? 用酶標儀檢測前需確保每個孔內沒有氣泡, 否則會干擾測定。
    ? 本產品僅限于專業人員的科學研究用, 不得用于臨床診斷或治療, 不得用于食品或藥品, 不得存放于普通住宅內。
    ? 為了您的安全和健康, 請穿實驗服并戴一次性手套操作。


    使用說明:
    1、 通常在 96 孔板中, 細胞增殖實驗和細胞毒性實驗分別接種細胞懸液(5000 個細胞和 2000 個細胞/100μL/孔, 具體每孔所用的細胞的數目, 需根據細胞的大小、 細胞增殖速度的快慢等因素決定)。 設置加了相應量細胞培養液、 藥物和 CCK-8 溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。
    2、 細胞貼壁 24 小時后, 按照實驗需要, 進行培養并給予 0-10 微升特定的藥物刺激。
    3、 藥物處理 2~4 天, 然后每孔加入 10 μL 的 CCK 溶液(注意不要在孔中生成氣泡, 它們會影響 OD 值的讀數)。
    4、 將培養板在培養箱內孵育 1~4 小時, 然后用酶標儀測定在 450nm 處的吸光度。
    5、如果暫時不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10 μL 0.1M 的 HCL 溶液或者 1% w/vSDS 溶液, 并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。 在 24 小時內吸光度不會發生變化。
    6、 培養基中酚紅的吸光度可以在計算時, 通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去, 因此不會對檢測造成影響。


    活力計算:
    細胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0 加藥)-A(空白)] ×100
    A(加藥): 具有細胞、 CCK 溶液和藥物溶液的孔的吸光度
    A(空白): 具有培養基和 CCK 溶液而沒有細胞的孔的吸光度
    A(0 加藥): 具有細胞、 CCK 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
    *細胞活力: 細胞增殖活力或細胞毒性活力


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